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2×KOD MasterMix(无染料)适合于扩增保真度要求较高的片段，具有扩增速度快、稳定性强、灵敏度高和特异性好等特点，扩增产物为平端，可直接克隆于平滑末端的载体中，也可用Taq聚合酶加A处理再与T载体连接。

KOD聚合酶融合SSB基因改造后，连接表达载体在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来，改造后保真度更高，扩增速度更快。KOD聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切核酸酶活性，能校对DNA扩增过程中产生的碱基错配，同时对PCR抑制剂有较高的耐受性，比如可以在含20%血液中扩出基因。KOD聚合酶延伸速度是普通Pfu DNA Polymerase 6倍。

• 使用方法中推荐的反应体系与反应条件仅供参考，需根据模板和引物的结构进行优化。
  
• 如反应体系不同，可按此比例增加或减少用量。
  
• 本制品未加染料，反应完成后，需加上样缓冲液混匀后进行电泳。

• 配制PCR反应体系：
  

  成分	用量	终浓度
  2×KOD MasterMix(无染料)	25μL	1×
  Primer F,10μM	2μL	0.4μM
  Primer R,10μM	2μL	0.4μM
  Template DNA	＜1μg	＜1μg/reaction
  ddH2O	至50μL

  注：扩增基因组时需要适当提高模板浓度。
• 设置PCR反应程序：
  

  步骤	温度	时间	循环数
  预变性	96℃	2～3min	1
  变性	96℃	15s	25～35
  退火	60℃	15s
  延伸	72℃	15～30s/kb
  最终延伸	72℃	2min	1
  保持	4～10℃	-	-

  注：退火温度60℃可以在大多数体系中获得良好的扩增结果。PCR反应特异性不高时，可以在55～68℃范围内适当调整退火温度；如果引物Tm值小于63℃，可以将退火温度按Tm值设定。
• 结果检测：反应结束后，取5μL反应产物加上样缓冲液，琼脂糖凝胶电泳检测。